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蛋白交互作用分析系統

簡要描述:蛋白交互作用分析系統主要用于生物學領域的冷光和熒光檢測波長測定:如
FRET(熒光共振能量轉移)分子設計的調查
BRET(生物發光共振能量轉移)分子設計的調查
熒光/冷光試劑的發展和質量控制
熒光/冷光反應的分析

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  • 廠商性質:代理商
  • 更新時間:2018-01-31
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蛋白交互作用分析系統

品牌介紹:

ATTO株式會社成立于1964年,是日本zui大、世界zui著名的電泳廠商之一,具有完整的常規電泳產品系列。作為日本*的電泳品牌,ATTO一直秉承著“世界信賴的品質”的精神,其產品憑借的精致和可靠的性能,具有了超越其他品牌產品的實力,成為小型電泳產品的。

ATTO株式會社同樣也是世界上zui早研制熒光發光儀器的廠家之一。隨著人類更深層次的探索生命的奧秘,熒光檢測已成為一種非常有效的手段。ATTO依托先進的技術和強大的科研實力,連續開發出多款的熒光檢測儀器,在應用上突破了傳統熒光儀器的局限性,把這項技術又提高到一個新的水平,滿足更高要求的科研工作要求。

蛋白交互作用分析系統

產品性能:

主要用于生物學領域的冷光和熒光檢測波長測定:如

FRET(熒光共振能量轉移)分子設計的調查

BRET(生物發光共振能量轉移)分子設計的調查

熒光/冷光試劑的發展和質量控制

熒光/冷光反應的分析

 

用途特征;

1. 分光功能;同時測定相同條件下的測量范圍內不同波長的光

2. 一個冷CCD相機做為檢測器,通過調節曝光時間即可增加檢測靈敏度

LumiFL-Spectro capture用一個高靈敏度的冷CCD做檢測器,增加了靈敏度,同時有利于整個波長范圍內的同時測量。這個單元是由光分離部分和檢測裝置做為基本結構;同時,如果客戶需要測量的樣品是靠熒光激發的,還能連接熒光激發光源進行測定(可選:請在要求中注明)。熒光樣品的測定可以用石英材質的容器,冷光樣品可以用塑料的小離心管。

 

硬件特征:

1、電子的冷CCD相機做為檢測器

2、CCD可以同時接收和檢測整個目標波長范圍區的所有光

3、CCD比光電倍增管PMT有更高的量子效率

4、所有波長同時檢測,大大縮短了檢測時間

5、測定波長范圍:400-800nm

6、可以長時間曝光(提高了微小樣品的檢測靈敏度)

7、如果裝置熒光激發光源,還可以測定FRET或熒光底物

 

與常規的分光計比較如下:

要捕獲弱光波長內的全部變化,必須要有測定小樣品的高靈敏度的檢測裝置。常規的光度計是在把光分散后采用光電倍增管(PMT)一個個的檢測,這樣的話,敏感度大大降低,同時可能會由于以下原因沒有達到一定光密度,導致樣品不能側定出光譜:

(1)PMT的定量效率本身就比CCD低

(2)測定時間短

更重要的是,如果為補償低靈敏度的不便而將掃描時間延長,冷光或熒光就會逐漸變細,反而得不償失,得不到精確的光譜。

 

LumiFL-Spectro capture

常規光度計

檢測器

冷的CCD

PMT

檢測方式

成批量

一個一個地、順序測定

時間

目標

光強低的光

高強度光

 

樣品測量:

發光樣品——濾光片元件組——細縫元件組——衍射光譜——所有波長的光通過冷CCD成批量檢測

1.樣品可以在石英杯或者PCR管內測定;冷光樣品(細胞或蛋白)都可以測

2.聚光鏡/濾光片:可以設定單片激發光濾片

3.細縫元件組:可以聚集樣品光

4.衍射光柵:分離樣品光

5.檢測元件:整個樣品的光被分離后的光譜可經冷CCD同時測定;測量時間短,可以通過長時間曝光達到提高靈敏度的效果。

 

舉例:

BRET樣品的測定:

當蟲熒光素加到藍色熒光素酶Vluc和黃色熒光蛋白YFP的融合蛋白上,熒光素和酶反應產生能量。一部分能量轉移到YFP上,BRET反應就開始了。如果我們插入一小段包含目的序列(KR)的短肽片段,它可以轉運酶PC1到Vluc-PC1這個復合蛋白上,識別并優先結合YFP的肽鏈序列。用AB-1850測定這個融合物的光譜,460nm下的Vluc冷光和527nm下的YFP都發出了強光,這樣BRET反應被有力地證實了。接下來,PC1加入反應體系,527nm下的光減弱了,峰值變小。這個結果可以這樣解釋:PC1搶先結合到復合蛋白上,切斷了能量轉移到GFP上的通路,所以BRET的效率降低,通過檢測數量的降低可以檢測PC1的活性。

生物技術領域的用途:

BRET或FRET用途中的評估分子設計

為完成BRET或FRET的實驗,首先需要預實驗階段的檢驗分子設計。這種情況下,用光學濾光片檢測冷光或熒光樣品不可能把樣品的全部發光波長都檢測到,同時也不能過有效而充分地檢測到能量轉移期間波長的變化。而如果用AB-1850,這些就不成問題了,可以有效地進行分子設計。

BRET或FRET:zui近這兩種技術成為熱門,被廣泛應用于分析蛋白間、蛋白和核酸間的,或者對蛋白進行修飾、剪切和空間構象改變后的功能研究。

FRET是一種現象,從激發熒光的分子(供體)產生的光能量激活了其它熒光分子(受體),從而受體發光。它一般發生在受體和供體間存在一定的距離和空間關系,通過測定發出的光的波長,就可以判斷FRET是否發生。

BRET 中,熒光分子(供體)被冷光分子所取代,光也不是由供體發出,而是受體被冷光分子的冷光激活。BRET 中,如果冷光底物在測定時加入,檢測就可以進行了,所以不需要高能量的激發光源裝置。這樣就降低了對樣品的損傷。

性能參數:

1.冷光、熒光測定裝置

 

 F值 F3.0
 測量波長范圍 400-800nm
 逆線性色散 60nm/mm
 波長分辨率 1.8nm
 重復性 ±0.6nm
 隙縫寬度 0.01nm-5nm(11步)
 曝光時間 1/20s----60min(26步)
 光接收裝置 電子冷CCD

 

2.光譜成像:

衍射光柵數目:1個(標準)光柵:150pc/mm

Braze 波長:500nm

3.測量樣品部分:

測定器皿:石英杯(4mm*4mm)/ 0.2ml PCR管/ 35mm 培養皿

樣品體積:10ul-100ul

瞬時冷光測定:注入孔(硅酮隔板)

激發光源的連接:FC接管(標配)

4.軟件:

功能:測量和光波數據分析

接口: USB2.0

5.體積和重量:

大?。?10mm(W)*725mm(D)*390mm(H)

重量:58kg            

電源:C100v  50/60Hz  290V

6.標準配件:

LumiFL-Spectro 光捕獲系統:1臺

35mm 平皿實驗組區:1PC

方形細胞樣品區:1PC

PCR管樣品區:1

熒光測量時的濾鏡托板:1

AC繩:1

USB接線:1

瞬時熒光測定時需要用到的試劑加樣接管:1

石英容器:1

PCR管:1袋

為瞬時測定提供的試劑加樣橡膠閥:1袋

數據分析軟件(CD版):1

 


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